眩晕专题迷路瘘管动物模型的建立

本文作者：饶秀丽侯涛朱子昂龙吉

通讯作者：尹时华(南宁，广西医院耳鼻咽喉头颈外科)

目的建立豚鼠迷路瘘管导致的反复发作的眩晕模型，用于后续探讨反复发作性眩晕的相关机制研究。方法选取成年实验用豚鼠30只，随机分为Ａ、Ｂ、C三组。Ａ组为单侧迷路破坏组，Ｂ组为迷路瘘管＋术耳鼓气耳镜鼓气组，Ｃ组为单纯迷路瘘管组。三组分別进行手术，动物苏醒出现单侧前庭功能紊乱症状后（以此记为术后零时），Ａ、Ｃ组作为对照组不做处理，Ｂ组用鼓气耳镜适当的增加患耳外耳道内的压力，每天１次。分别于术后0ｈ、24ｈ、48ｈ、1ｗ、2ｗ、3ｗ等不同时间段记录三组动物的失衡症状即自发性眼震频率、头偏斜及失衡行为评分。结果通过对动物自发性眼震、头偏斜及失衡行为评分的定量观察，可知同一时间段（除0ｈ外）各失衡症状Ｂ组与其他两组有显著性差异。同组内自发性眼震、头偏斜和失衡行为评分在各个时间段之间均有差异，各时间段失衡症状随着时间推移逐渐减轻直至消失，Ｂ组减轻程度不及其他两组。至术后48ｈ，三组均已无自发性眼震，Ｂ组用鼓气耳镜给术耳外耳道适当鼓气仍可出现（5-6次／15秒）的眼震，其他两组无。至术后2ｗ，Ａ、Ｃ两组各失衡症状均已不存在，Ｂ组仍存在头偏斜等失衡症状，用鼓气耳镜给术耳外耳道适当鼓气仍可出现（5-6次／15秒）的眼震。这种现象直到术后3ｗ还存在。结论１．制造迷路瘘管并且用鼓气耳镜适当增加术耳外耳道压力方法可建立眩晕动物模型；２．本实验建立的眩晕动物模型通过诱发眩晕可反复发作。

反复发作性眩晕；迷路瘘管；前庭代偿；豚鼠

前庭代偿动物模型的建立已有多年的历史，传统方法都是单纯的手术或化学方法或手术加化学方法来破坏迷路，这些方法都是通过单侧迷路切除或是单侧迷路损毁使动物出现急性眩晕，这种前庭代偿动物模型所出现的急性眩晕症状大多在一周内得到代偿。基于反复发作性眩晕一直是临床一大难以解决的问题之一，本实验通过制造迷路瘘管，使动物出现反复发作的眩晕，用于研究前庭代偿的中枢机制，对临床治疗反复发作性眩晕提供进一步的研究依据。

一、材料与方法1动物分组

健康成年杂色豚鼠（-g）30只，雌雄不限。电耳镜检查外耳道通畅、鼓膜标志清晰、中耳无感染、耳廓反射正常，无自发性眼震。豚鼠随机分为三组，即A组为单侧迷路破坏组，B组为迷路瘘管+耳镜鼓气组，C组为单纯迷路瘘管组，每组10只(动物由广西医科大学实验动物中心提供)。

2实验方法

所有豚鼠均已左耳为手术耳。A组成年杂色豚鼠（-g）以4%木巴比妥钠（4ml/kg）腹腔注射麻醉。剪毛，消毒，取耳后下切口，暴露听泡并打开，以显微剥离子及吸引器打开前庭并破坏、吸除耳石器及壶腹嵴等，将浸有无水乙醇的明胶海绵置入前庭，缝合切口，消毒皮肤切口，切口周围涂上红霉素软膏，造模完成。术后７天内每天给予切口周围消毒，涂上适量红霉素软膏。B组成年杂色豚鼠（-g）以4%木巴比妥钠（4ml/kg）腹腔注射麻醉。手术包括两部分。①剪毛，消毒，沿耳廓根部做1-2cm的环形切口，分离皮肤筋膜及其肌肉，暴露颞线，用直径为1.2mm颅转转头在颞线下方环形钻孔，直至暴露外半规管和上半规管。换直径为0.8mm的颅转转头分别在外半规管和上半规管钻下约2mm长的裂隙，手术应轻柔操作以防转头将半规管钻断或是将半规管整段磨除，用消毒过的针灸针轻轻来回划破膜迷路，术中可见到清亮的淋巴液漏出来。在孔及半规管裂隙周围置入适当的棉药，并滴入1-2滴地塞米松注射液。②按如上的手术留下的转孔后方约2cm的位置就是听泡，用颅转打开听泡，寻找到圆窗，用针灸针挑开圆窗膜，并将长度适宜消毒过的筛孔状的PE管置入圆窗内，并轻轻转动一两圈以破坏圆窗膜。同样以适量的药棉覆盖转孔的周围，滴入1-2滴地塞米松注射液。缝合切口，消毒皮肤切口，切口周围涂上红霉素软膏，造模完成。术后7天内每天给予切口消毒，涂上适量红霉素软膏。C组动物手术过程与B组完全一致。

3前庭代偿指标的记录

以动物清醒出现急性单侧迷路功能丧失症状计为零时，观察并记录动物术后0h、24h、48h、1w、2w、3w等几个时间点的自发性眼震、头偏斜及失衡行为评分的动态变化过程。B组动物在术后清醒时观察并记录症状，然后给与左耳鼓气耳镜鼓气，每次鼓气10下，每天1次。

1、自发性眼震的记录

自发性眼震以15秒为单位（次/15秒），连记3次，取平均值。

2、头偏斜角度的测量

由骶骨中央至第一胸椎中央处连一直线，由鼻尖至颅顶正中连一直线，两延长线间的夹角即为头偏斜的度数。

3、失衡行为得分

参考Petrosini报告的方法，对头偏斜、躯干卷曲、肢体外展、强迫环形运动和头震（或称眼震样头震）等5个失衡症状分别评分，失衡症状存在至最严重为2分，症状消失为0分，总分在0-10分之间。

4统计学分析

所有实验数据用SPSS16．0统计分析软件进行两样本t检验分析，以(x±s)表示，以P＜0.05为差异有统计学意义。

二、结果

1行为学改变

豚鼠在手术后1-2h从麻醉中清醒，随即出现术侧急性前庭功能紊乱的多种失衡症状，主要有快相健侧的自发性眼震，并伴向术侧的头眼震样摆动（Headnystagmus）,又称头震；头明显偏向术侧，偏斜度甚至超过与躯体纵轴的垂直线；沿躯体纵轴向术侧翻滚；术侧肢体往外伸展，以地面垂直轴为中心向术侧环形爬行。三组动物的各种失衡症状随时间的推移逐渐减轻并消失，这一过程存在着个体差异，同一时段内失衡症状的减轻程度A组C组B组，如术后48h三组均已无自发性眼震，用鼓气耳镜给术耳外耳道适当鼓气仍可出现（5-6次/15秒）的眼震，其他两组无。术后2w和3w，A、C两组各失衡症状均已不存在，B组仍存在头偏斜等失衡症状，且用鼓气耳镜给术耳外耳道适当鼓气让客出现（5-6次/15秒）的眼震。

2前庭代偿各项测量指标的分析

豚鼠刚清醒时眼震频率最高，幅度也最大，之后有逐渐降低的趋势。头偏斜角度、失衡行为评分的变化幅度也和眼震的较一致（见表1）。

术中制造迷路瘘管所见即术后豚鼠失代偿症状上图

三、讨论

一侧前庭外周器官部分或完全损伤（外伤、额骨骨折、迷路震荡、颅脑外伤、手术、细菌或病毒感染等）后，同侧前庭输入下降或缺失并引起静态症状和动态症状，表现为眩晕、呕吐和快相向健侧的眼震，头偏向同侧、站立不稳和向患侧倾倒等平衡失调或失平衡症状。四足动物还可出现头眼震样摆动、同侧肢体外展、被动环形步态及沿身体长轴向伤侧翻滚等失衡症状。

损伤单侧前庭感受器活前庭神经会导致多种动物运动行为的紊乱，这种紊乱可随时间推移逐渐被代偿，并且运动功能几乎可全部恢复。而这种恢复是在中枢神经系统的代偿重组下完成的，这个过程就叫做前庭代偿（vestibular







































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